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BALB/c-Nude （裸鼠）
品系編號(hào)：C000103
品系背景：BALB/c
遺傳背景：BALB/c
基因名稱：Foxn1
品系描述：純合自發(fā)突變裸鼠的主要缺陷是毛發(fā)生長異常，表現(xiàn)為全身形似無毛，呈裸體外表，隨鼠齡增加，其皮膚變薄，頭頸部皮皺褶、發(fā)育遲緩；裸鼠無胸腺，或僅有胸腺殘跡或異常胸腺上皮，該上皮不能使T細(xì)胞正常分化，導(dǎo)致缺乏成熟的T淋巴細(xì)胞，因而細(xì)胞免疫功能低下，缺乏細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)，是免疫缺陷動(dòng)物；純合型雌裸鼠受孕率低，乳腺發(fā)育不良且有食仔習(xí)慣，為提高繁殖率和存活率，一般采用純合型雄鼠與雜合型雌鼠交配的繁殖方式，可以獲得1/2純合型仔鼠。裸鼠毛囊與正常有毛鼠相比，毛囊數(shù)量和功能都沒有差別，均能夠產(chǎn)生正常的毛根和毛桿。但對(duì)于純合子裸鼠來說，由于Foxn1 基因功能缺失，毛桿中缺乏角蛋白而變得非常纖弱，絕大部分毛桿不能正常穿透表皮，而是扭曲盤繞在膨脹的毛囊漏斗內(nèi)，因此皮膚眼觀上為光裸的。
基因描述：Foxn1（forkhead box N1）是在胸腺上皮細(xì)胞中表達(dá)的蛋白質(zhì)，是一種轉(zhuǎn)錄因子，其在發(fā)育過程中，參與免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)、代謝，在癌癥和衰老中發(fā)揮重要的作用。該基因家族有100多個(gè)成員，編碼的蛋白質(zhì)主要是調(diào)節(jié)胸腺的發(fā)育和角化細(xì)胞的分化，F(xiàn)oxn1參與T細(xì)胞成熟和調(diào)節(jié)基因及抗原的表達(dá)。Foxn1基因突變純合子小鼠表現(xiàn)出毛發(fā)生長異常和胸腺上皮發(fā)育缺陷，小鼠出現(xiàn)無毛表型，因此Foxn1基因突變純合子小鼠又稱為“裸鼠”。
應(yīng)用領(lǐng)域：廣泛地應(yīng)用于皮膚和頭發(fā)質(zhì)地缺陷、腎上腺皮質(zhì)缺陷、甲狀腺缺陷、T細(xì)胞缺陷、胸腺缺陷、癌癥研究、異種移植等領(lǐng)域，裸鼠的應(yīng)用降低了胸腺切除手術(shù)的研究。
品系特征：小鼠攜帶Foxn1突變，導(dǎo)致胸腺發(fā)育不良，T細(xì)胞缺失，細(xì)胞免疫缺失；同時(shí)對(duì)胸腺依賴性抗原的反應(yīng)存在局限性，導(dǎo)致B細(xì)胞功能受損；NK細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、抗原遞呈細(xì)胞數(shù)量及功能正常，補(bǔ)體活性正常。
BALB/c-Nude小鼠注意事項(xiàng)
1、裸鼠飼養(yǎng)籠盒內(nèi)不適合放入玩具等物品，以防刮傷皮膚。
2、特定通風(fēng)凈化（SPF）級(jí)別的環(huán)境中飼養(yǎng)，以減少感染風(fēng)險(xiǎn)。
3、溫度控制：保持恒定溫度（22-25°C），避免溫度波動(dòng)。
4、濕度控制：保持適宜濕度（50-60%），防止過于干燥或潮濕。
5、光照周期：通常采用12小時(shí)光暗周期，避免光照過強(qiáng)或過弱。
6、無菌飼料：使用無菌飼料，避免普通飼料可能帶來的微生物污染。
7、無菌水：提供蒸餾水或經(jīng)過超濾處理的水，確保無菌。
| 品系 | 性別 | 3~4w | 4~5w | 5~6w | 6~7w | 7~8w | 8~9w | 9w以上 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| BALB/c-Nude | ♂ | 12~16 | 15~19 | 18~23 | 19~24 | 20~25 | 21~26 | 21~26 |
| BALB/c-Nude | ♀ | 10~14 | 14~18 | 16~20 | 18~22 | 19~23 | 20~24 | 20~24 |
(裸鼠各周齡生長體重變化 單位: g)
實(shí)驗(yàn)步驟
細(xì)胞準(zhǔn)備
1）取處于對(duì)數(shù)生長期的細(xì)胞，細(xì)胞達(dá)80-90%左右密度為宜。收集細(xì)胞前一天晚上更換新鮮培養(yǎng)基。
2）胰酶消化細(xì)胞后用預(yù)冷的PBS洗兩遍，去除細(xì)胞中的血清。
3）用PBS或者無血清培養(yǎng)基吹打細(xì)胞沉淀至濃度4.7×10^7個(gè)細(xì)胞/ml，小鼠接種腫瘤細(xì)胞數(shù)量為2.35×10^6細(xì)胞/位點(diǎn)，吸取50ul細(xì)胞懸液與50ul基質(zhì)膠。
4）細(xì)胞消化后30min內(nèi)接種到小鼠皮下。
5）接種前用槍將細(xì)胞懸液充分的吹散，防止細(xì)胞成團(tuán)而降低細(xì)胞成活率。
小鼠注射接種
接種點(diǎn)選擇小鼠兩側(cè)肩胛部，碘伏消毒皮膚后將混有基質(zhì)膠的細(xì)胞懸液注射至目標(biāo)部位；注射完畢后，緩慢退出針頭，無菌棉簽按壓穿刺點(diǎn)1min；每周2次測量小鼠腫瘤體積。
細(xì)胞成瘤驗(yàn)證(近100株腫瘤細(xì)胞)
| Cacer Type | Cell Lines |
|---|---|
| 乳腺癌 | BT-474(人乳腺導(dǎo)管癌)... |
| 宮頸癌 | SIHA(人子宮頸鱗癌細(xì)胞)、 C-33A(人宮頸癌細(xì)胞).. |
| 卵巢癌 | A2780(人卵巢癌細(xì)胞)、 |
| 肝癌 | Huh7(人肝癌細(xì)胞)、 Huh-6(人肝母細(xì)胞瘤)、 MHCC97-H(人肝癌細(xì)胞)、 HepG2(人肝母細(xì)胞瘤)、 MAHLAVU(人肝癌細(xì)胞)... |
| 肺癌 | NCI-H1299(人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞)、 NCI-H1975(人肺腺癌細(xì)胞)、 H358(人肺腺癌細(xì)胞).. |
| 腸癌 | HCT-8(人回盲腸癌細(xì)胞)、 HCT-116(人結(jié)腸癌細(xì)胞)、 HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞)... |
| 前列腺癌 | 22RV1(人前列腺癌細(xì)胞)... |
| 鼻咽癌 | C666-1(人鼻咽癌細(xì)胞)... |
